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透明和浸蜡

日期:2016-10-24 11:21:24

为了使石蜡能够浸入到组织块内,必须经过一种既能与脱水剂混合,又能与石蜡相溶的媒介物质,这个过程称透明。目前最好的透明剂是二甲苯。很多人认为二甲苯极容易使组织发脆,这个观点并不正确,在固定充分、脱水彻底的情况下,二甲苯并不会引起组织发脆,相反会使某些组织结构比较质韧的组织(比如子宫肌瘤等)由于透明充分而变的更好切。而所谓的发脆,往往是组织浸蜡充分,使组织恢复到其原有的质地,在蜡块冰冻的情况下产生的,如果用冰水或常温切片,就不会有脆的现象。所以二甲苯透明(2道)各30-60分钟,如果有时间,时间可以更长,透明充分,蜡也能浸的更充分,那怕就是透明过夜,甚至60度过夜也没有问题。但如果组织内有极少量水份且组织较小或较薄时,二甲苯在高温下将水“析”出或水份挥发,在此过程中可能会导致组织干烤,从而导致组织发硬(具体原因不明)。

组织透明后,在熔化的石蜡内浸渍的过程称为浸蜡。目的为了使石蜡渗透到组织中去。浸蜡温度过高(超过60℃),如果小组织内含有少量水份,会导致小组织发硬,还会使组织内的抗原受到破坏;所以浸蜡用的石蜡熔点应该在54-56℃左右(三道),时间:第一道:石蜡30分钟;第二道:石蜡60分钟;第三道:石蜡,90分钟以上。浸蜡温度控制在56~58℃左右。(第一道也可用硬脂酸石蜡1:3混合浸蜡,不仅可软化组织,特别适用于比较韧、硬的组织,而且由于硬脂酸是弱酸性的,染色后核浆比比较鲜明,缺点是容易脱片,疏松组织在展片时容易散开,所以要用后面几道石蜡尽可能将硬脂酸洗净。所以一般不要使用此法)。用开放式的脱水机最好每天打开第一道石蜡的盖子,让二甲苯挥发掉。浸蜡用的石蜡如有杂质应该过滤,以防吸入组织内,造成切片刀刀口受损,或切片破碎和划痕增多。

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